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銅藍(lán)蛋白(Cp)檢測試劑盒(微量法100T/48S)
| 貨號 | SH0056 | 售價（元） | 408 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0056 |
銅藍(lán)蛋白(Cp)檢測試劑盒(微量法100T/48S) |
100T/48S |
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白，有運輸銅的功能，同時具有氧化酶的活性，是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑。
測定原理：
銅藍(lán)蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物，在645nm處有特征吸收峰，依此可得銅藍(lán)蛋白活性。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0056-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
7ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
15ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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試劑三：液體15ml×1瓶，4℃避光保存。（使用前37℃預(yù)熱）
自備儀器和用品：
天平、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
測定操作表
1、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至645nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 操作表
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空白管 |
測定管 |
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樣品（μl） |
30 |
30 |
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試劑一（μl） |
90 |
90 |
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試劑二（μl） |
60 |
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混勻，37℃預(yù)熱5min |
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試劑三（μl） |
120 |
120 |
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混勻，37℃反應(yīng)30min |
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試劑二（μl） |
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60 |
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混勻，25℃室溫放置5min，取200μl于微量石英比色皿/96孔板中，測定645nm處吸光值。 ΔA=A測定-A空白。 |
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計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、 按體積計算
酶活定義:37℃條件下， 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力（U/ml）=ΔA×V反總÷0.01÷V樣÷T = 33.33×ΔA
2、 按鮮重計算
單位定義：37℃條件下，每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力（U/g鮮重）=ΔA×V反總÷0.01÷（W×V樣÷V樣總）÷T = 33.33×ΔA÷W
3、 按蛋白濃度計算
單位定義：37℃條件下，每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力（U/ mg prot）=ΔA×V反總÷0.01÷（Cpr×V樣）÷T = 33.33×ΔA÷Cpr
V樣：0.03 ml；V反總：0.3 ml；T：反應(yīng)時間，30min；V樣總：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g
b. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、 按體積計算
酶活定義:37℃條件下， 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力（U/ml）=ΔA×V反總÷0.005÷V樣÷T = 66.66×ΔA
2、 按鮮重計算
單位定義：37℃條件下，每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力（U/g鮮重）=ΔA×V反總÷0.005÷（W×V樣÷V樣總）÷T = 66.66×ΔA÷W
3、 按蛋白濃度計算
單位定義：37℃條件下，每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力（U/ mg prot）=ΔA×V反總÷0.005÷（Cpr×V樣）÷T = 66.66×ΔA÷Cpr
V樣：0.03 ml；V反總：0.3 ml；T：反應(yīng)時間，30min；V樣總：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g
注意事項:
試劑二和試劑三有一定的毒性和刺激性，請操作時做好防護措施。