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單寧含量檢測(cè)試劑盒(分光光度法 50T/48S)
貨號(hào) | SH0037 | 售價(jià)(元) | 768 |
規(guī)格 | 50T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0037 |
單寧含量檢測(cè)試劑盒(分光光度法 50T/48S) |
50管/48樣 |
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
單寧是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物,又稱植物多酚。具有獨(dú)特的化學(xué)性質(zhì)和多種生理活性,如能與蛋白質(zhì)、生物堿、多糖結(jié)合;能與多種金屬離子發(fā)生絡(luò)合或靜電作用;具有止血、抑制微生物、抗過敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。
測(cè)定原理:
單寧在堿性環(huán)境下與磷鉬酸反應(yīng),生成藍(lán)色化合物,在760nm處有最大吸收峰。
試劑的組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0037-50T/48S |
Storage |
試劑一:液體 |
10ml |
4℃ |
試劑二:液體 |
8ml |
4℃ |
說明書 |
一份 |
需自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。
單寧的提?。?/span>
按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml蒸餾水),充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,80℃水浴提取30min, 8000 g,25℃離心10 min,取上清液待測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至760nm,蒸餾水調(diào)零;試劑一和試劑二37℃預(yù)熱10min以上;
2、操作表:
試劑名稱(μl) |
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
樣本 |
|
25 |
蒸餾水 |
675 |
650 |
試劑一 |
175 |
175 |
混勻,室溫靜置5min
試劑二 |
150 |
150 |
混勻,室溫靜置30min,760nm處讀取吸光值A,ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照,對(duì)照管只要做一管。
單寧含量計(jì)算:
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 1.6418x +0.0134;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為ΔA(A測(cè)定-A對(duì)照)。
2、按樣本鮮重計(jì)算:
單寧含量(mg /g鮮重)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(W×V1÷V2)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單寧含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr。
V1:加入樣本體積,0.025ml;V2:加入提取液體積,1ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g。
注意:
1、 ΔA控制在0.02-0.8范圍內(nèi),若ΔA大于0.8,將樣本提取上清液用蒸餾水稀釋10倍后檢測(cè),計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為:0.025mg/ml-0.5mg/ml。