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PK Mito Orange Fix

貨號(hào) PKMOF-1/PKMOF-2 售價(jià)(元) 6500/1680
規(guī)格 50次/10次 CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

1.產(chǎn)品信息

產(chǎn)品

貨號(hào)

包裝固體)

適用范圍

凍存條件

保質(zhì)期

PK?Mito?Red

PKMR-1/-2

25?nmol/5nmol

熒光顯微鏡、Confocal、SIM

-20?

避光保存

一年

PK?Mito Orange

PKMO-1/-2

25?nmol/5nmol

熒光顯微鏡、

Confocal、SIM、STED

-20?

避光保存

PK?Mito Deep Red

PKMDR-1/-2

25?nmol/5nmol

熒光顯微鏡、Confocal、SIM

-20?

避光保存

PK Mito Orange Fix

PKMOF-1/-2

50次/10次

熒光顯微鏡、

Confocal、SIM、STED

-20?

避光保存

2.產(chǎn)品簡介

PKMITO??系列的Red、Orange?Deep Red 具有非常低的化學(xué)毒性、光學(xué)毒性和優(yōu)秀的線粒體定位能力,適用于活細(xì)胞線粒體成像。除此之外,此系列產(chǎn)品也已經(jīng)在斑馬魚等小動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中用于線粒體成像。PKMO FX 在細(xì)胞經(jīng)醛類固定液固定后依然有高的線粒體熒光保留,適用于固定細(xì)胞線粒體成像。綜合這些優(yōu)異的性能,PKMITO??系列產(chǎn)品非常適合用于多種場(chǎng)景下的線粒體成像,尤其在SIM?STED 等超分辨成像和細(xì)胞分選等領(lǐng)域。

3.?實(shí)驗(yàn)步驟

活細(xì)胞線粒體染料可參考以下步驟:

3.1 在PK?Mito?Red/?Orange/?Deep Red中加入100?μL25 nmol/20μL(5 nmol)新鮮干燥的?DMSO,混合均勻,得到250 μM母液。

3.2 將培養(yǎng)基預(yù)熱至37?,將PK?Mito?Red/?Orange/?Deep Red母液按照1000 - 5000倍稀釋比例加入到預(yù)熱的培養(yǎng)基中,稀釋后的染液建議盡快使用,久置后可能導(dǎo)致部分染料分解或沉淀。

3.3 吸去細(xì)胞原有的培養(yǎng)基,更換為稀釋好的培養(yǎng)基染液,在培養(yǎng)箱中孵育15分鐘。

3.4 用預(yù)熱的培養(yǎng)基清洗細(xì)胞一至兩次,即可用于熒光成像。

注:我們建議對(duì)大多數(shù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞使用200-300 nM,如HeLa、COS7、U-2OS、Vero細(xì)胞、原代神經(jīng)元、脂肪細(xì)胞和肝細(xì)胞;對(duì)組織染色使用500-600 nM。

不同樣品染色條件有所差異,建議起始染色方法為1000倍稀釋,15分鐘染色,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際染色效果進(jìn)行調(diào)整。

固定細(xì)胞線粒體染料可參考以下步驟:

3.5?PK Mito Orange Fix 中加入100μL50?次)/ 20 μL10 次)新鮮干燥的DMSO,混合均勻,得到250 μM?母液。

3.6?將培養(yǎng)基預(yù)熱至37 ℃,將PK Mito Orange Fix 母液500 倍稀釋加入到預(yù)熱的培養(yǎng)基中,得到500nM 的染色工作液,稀釋后的染液建議盡快使用,久置后可能導(dǎo)致部分染料分解或沉淀。

3.7 吸去細(xì)胞原有的培養(yǎng)基,更換為稀釋好的培養(yǎng)基染液,在培養(yǎng)箱中孵育20 分鐘至90 分鐘。

3.8 用預(yù)熱的培養(yǎng)基清洗細(xì)胞一至兩次,即可用于活細(xì)胞熒光成像。

3.9 用預(yù)熱的PBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次,加入預(yù)熱的2.5%戊二醛或4%多聚甲醛等醛類固定液固定15 分鐘。用PBS 緩沖液清洗細(xì)胞后,即可用于固定細(xì)胞成像。

注:我們建議對(duì)大多數(shù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞使用500 nM?濃度染液作為起始點(diǎn)優(yōu)化染色條件,如HeLa、COS7、原代神經(jīng)元、心肌細(xì)胞等。

不同樣品染色條件有所差異,建議起始染色方法為500 倍稀釋,20 分鐘染色,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際染色效果進(jìn)行調(diào)整。維拉帕米(Verapamil)可以在染色中加入,有助于得到更明亮均勻的染色線粒體。

?

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PK Mito Red

PK Mito Orange

PK Mito Deep Red

PK Mito Orange Fix

λEx

549 nm

590 nm

644 nm

584 nm

λEm

569 nm

610 nm

670 nm

604 nm

λSTED

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775 nm

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775 nm

4.染料光學(xué)性


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