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2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix

貨號 25102 售價(元) 1680
規(guī)格 100 rxn CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品簡介

        2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix 適用于以 DNA 模板的 LAMP (環(huán)介導等溫擴增) 反應(yīng)。LAMP 是常見的等溫擴增技術(shù),使用 LAMP 特異性引物和鏈置換聚合酶 Bst.快速擴增靶標核酸。該試劑盒是 2×預(yù)混液,包含 Bst.鏈置換聚合酶和優(yōu)化的 LAMP 緩沖液。本產(chǎn)品中采用基因工程改造的 Tolo Bst. DNA polymerase,具有良好的耐熱性能,非常適宜 LAMP 擴增。本產(chǎn)品同時提供熒光染料,便于在靶標核酸擴增過程中進行實時熒光監(jiān)測。

產(chǎn)品組分

組分

25102 (100 rxns)

2 × Tolo Super LAMP Premix

            1.25 mL

50 × LAMP Floorescent Dye

            50 μL

保存條件

        ≤ -20℃儲存,≤ 0℃運輸;

實驗流程

1.制備10 × LAMP Primers Mix:

組分

體積

10 × 濃度(STOCK)

1 × 濃度(STOCK)

FIP Primers(100 μM)

16 μL

16 μM

1.6 μM

BIP Primers(100 μM)

16 μL

16 μM

1.6 μM

F3 Primers(100 μM)

2 μL

2 μM

0.2 μM

B3 Primers(100 μM)

2 μL

2 μM

0.2 μM

Loop F Primers(100 μM)

4 μL

4 μM

0.4 μM

Loop B Primers(100 μM)

4 μL

4 μM

0.4 μM

ddH2O

Up to 100 μL

 

 

◆ 在 nuclease-free water 中制備的 10 ×LAMP Primers Mix 可在–20°C 儲存長達 2 年。

 2.制備LAMP 反應(yīng)體系:

組分

       體積

2 × Tolo Super LAMP Premix 

     12.5 μL

10 × LAMP Primers(supplied by user)

      2.5 μL

50 × LAMP Floorescent Dye  

      0.5 μL

Target DNA

      x μL(不超過反應(yīng)總體積的 1/10)

ddH2O

      Up to 25 μL

◆ 室溫解凍所有組分后置于冰上,短暫渦旋并瞬離后使用。

◆ 吸取反應(yīng)預(yù)混液到所需的反應(yīng)容器中并添加待測樣品,短暫渦旋并瞬離后反應(yīng)。

◆ 建議設(shè)置無模板的陰性對照反應(yīng)體系,并用等體積的 nuclease-free water 補齊反應(yīng)體系。

 3.LAMP 反應(yīng)程序

         配制完成后,將上述反應(yīng)體系置于 65℃孵育 30~60 min。對于拷貝數(shù)較低的待測靶標或復雜樣品類型的反應(yīng),可根據(jù)需要適當延長擴增時間。85℃加熱 5 min 便可滅活體系中的 Bst.酶。

注意事項

        1. 可在冰上或室溫條件下,將 2 × Tolo Super LAMP Premix 解凍,充分混勻后使用;不推薦對預(yù)混液進行加熱溶解。

        2. 建議反應(yīng)完成后避免開蓋。如需瓊脂糖凝膠電泳或其他后續(xù)分析,應(yīng)在分區(qū)空間或單獨設(shè)備中進行開蓋。

        3. 本產(chǎn)品僅供科研使用。