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胎牛血清是指胎牛血液凝固后，去除血漿中纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色澄清液體，它是肉類加工業(yè)的一個(gè)副產(chǎn)品。

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成分，具有極為重要的功能，一般添加比例為：5-20%。血清中含有各種氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)等這些維持細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)物質(zhì)，也含有胰島素、氫化可的松、地塞米松、bFGF、EGF、PDGF、轉(zhuǎn)鐵蛋白等可促進(jìn)細(xì)胞生長的激素、生長因子及結(jié)合蛋白。此外，血清還有解毒、緩沖、抑制蛋白酶活性等作用保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

依科賽胎牛血清均采自非疫區(qū)的健康牛，經(jīng)無菌采集、批量混合、3級100 nm過濾器過濾分裝而成，不含支原體和BVDV、PI3、IBR、BTV等牛源病毒。

Q and A:

為什么要使用正規(guī)進(jìn)口的血清？

①走私血清缺乏檢驗(yàn)檢疫監(jiān)管，冷鏈運(yùn)輸無法保障，嚴(yán)重影響血清批內(nèi)和批間穩(wěn)定性，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果不可控；②正規(guī)的血清來源于中華人民共和國海關(guān)總署允許進(jìn)口的非疫區(qū)國家，而很多走私的血清往往來自發(fā)生過疫情的國家。未經(jīng)檢疫的血液制品中可能攜帶傳染性物質(zhì)，一旦流入境內(nèi)，可能會(huì)對試者和研究人員的生命健康造成威脅。

FBS中含有的絮狀物是什么東西 ?

FBS中的絮狀物可能由很多種原因造成，其中最常見的沉淀主要成分是纖維蛋白和脂蛋白，不會(huì)影響血清品質(zhì)，沉淀若需去除，視沉淀大小500-1000×g，離心5-10min去除，也可不做處理。

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎 ? 如何處理 ?

一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否渾濁，然后在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變渾濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：①細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘??；②配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；③培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除；④血清等級不足以維持細(xì)胞良好的生長。

血清使用前是否有必要熱滅活，如何熱滅活？

請先確認(rèn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方案是否需要對血清進(jìn)行熱滅活。一般不建議熱滅活，熱滅活處理會(huì)損失血清中部分營養(yǎng)成分，并且容易發(fā)生蛋白質(zhì)聚集沉淀；少數(shù)對補(bǔ)體敏感的實(shí)驗(yàn)需要（如某些免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，腺病毒包裝，某些PS培養(yǎng)等），可酌情使用熱滅活血清。熱滅活方法：血清完全解凍充分搖勻后置于56℃水浴中30min，期間不時(shí)晃動(dòng)均勻。

熱滅活是必須的嗎 ?

實(shí)驗(yàn)顯示，熱滅活對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱滅活的血清，會(huì)增加沉淀產(chǎn)生的概率，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過程中局部溫度過高，搖晃不均勻，滅活時(shí)間過長，都會(huì)造成血清品質(zhì)下降。若非必須，可以不需要做熱滅活這一步。不但節(jié)省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量！

不同批次血清顏色為什么有差異 ?

血清中含有微量的血紅蛋白，與采集血液過程中血細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān)，只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān)，不影響細(xì)胞培養(yǎng)。中國藥典規(guī)定血紅蛋白含量≤200mg/L。

如果我的FBS到達(dá)時(shí)已經(jīng)部分解凍，還能使用嗎 ?

所有的ExCell Bio血清都在冰凍狀態(tài)下由干冰運(yùn)輸，因此您收到時(shí)應(yīng)該仍是冰凍狀態(tài)。如果只是部分解凍，F(xiàn)BS仍然可以使用，但是建議先將FBS在冰箱中充分解凍，之后溫和的搖晃搖勻，再移至-10℃及以下進(jìn)行儲(chǔ)存。

培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎 ?

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在2周內(nèi)使用它。

應(yīng)該如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損 ?

建議血清應(yīng)保存在-10℃及以下。若一次無法用完一瓶，無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。解凍時(shí)，建議將血清從冷凍室先移至2-8℃冰箱解凍，再放置于室溫進(jìn)行徹底解凍。請注意，解凍過程中需要經(jīng)常搖晃混合。嚴(yán)禁將FBS在37℃長時(shí)時(shí)間孵育解凍