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產(chǎn)品信息

      Epi5? Episomal iPSC 重編程試劑盒提供一組 5 個(gè)由 Okita 博士在京都大學(xué) iPS 細(xì)胞研究及應(yīng)用中心 (CiRA) 的 Yamanaka 教授實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行設(shè)計(jì)的易于使用、高效游離型載體。本系統(tǒng)可產(chǎn)生無(wú)轉(zhuǎn)基因、無(wú)病毒人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 (iPSC)，在 0.04% 至 0.3 范圍內(nèi)其效率取決于重編程的細(xì)胞類型。

      Epi5? Episomal iPSC 重編程試劑盒的特點(diǎn)包括： 

? 易于使用且高效—在重編程過(guò)程中無(wú)需使用小分子，并且已添加的 p53 抑制可提高 iPSC 生成 (1)

? 可用于您的 iPSC 研究的所有階段—無(wú)轉(zhuǎn)基因且無(wú)病毒的重編程使得操作可用于從基礎(chǔ)研究到臨床前研究

? 培養(yǎng)基系統(tǒng)具有靈活性—可用于無(wú)飼養(yǎng)層或基于飼養(yǎng)層的培養(yǎng)基系統(tǒng)

創(chuàng)建轉(zhuǎn)基因和無(wú)病毒 iPSC

      游離型載體是一種經(jīng)過(guò)充分描述的用于生成無(wú)轉(zhuǎn)基因、無(wú)病毒 iPSC 的系統(tǒng)，為多能干細(xì)胞研究的所有階段提供 iPSC 來(lái)源。其他重編程方法，例如慢病毒屬，包含可整合到宿主基因組的轉(zhuǎn)基因，可能破壞宿主基因組，或者引起其它不可預(yù)測(cè)的結(jié)果。

      作為 oriP/EBNA1 載體，這些游離型載體包含 5 種重編程因子（Oct4、Sox2、Lin28、Klf4 和 L-Myc），并在每個(gè)細(xì)胞周期中在染色體外僅復(fù)制一次。在這種復(fù)制速率下，以每細(xì)胞代約 5% 的速率丟失游離體。該系統(tǒng)通過(guò) p53 抑制增強(qiáng) iPSC 生成，并證明人類 iPSC 生成期間包含的 L-Myc 的效力和特異性均高于 c-Myc (1)。

系統(tǒng)易于使用

      該 2 樣品瓶套件可為游離型載體重編程提供較佳系統(tǒng)，無(wú)需在重編程培養(yǎng)基中使用小分子。游離型載體通過(guò)電穿孔引入細(xì)胞。我們推薦使用 Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)進(jìn)行電穿孔，以便靈活改變體積，從而改變重編程所需的細(xì)胞數(shù)量。

可靈活選擇培養(yǎng)基系統(tǒng)

      Epi5? Episomal iPSC 重編程試劑盒可與多種細(xì)胞類型和培養(yǎng)基系統(tǒng)配合使用。成纖維細(xì)胞和 CD34+ 血細(xì)胞的方案可以提供飼養(yǎng)層或無(wú)飼養(yǎng)層的重編程。

      1.Okita K、Matsumara Y、Sato Y 等人。生成無(wú)整合人 iPS 細(xì)胞的更有效方法。Nature Methods 8, 409-412, 2011.