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LwaCas13a Nuclease 核酸酶 Cas13a

貨號(hào) E381 售價(jià)(元) 2600/10400
規(guī)格 200pmol/1000pmol CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品信息

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

單價(jià)/

E373-YH01-01B

LbaCas12a Nuclease

50ug

1286

E373-YH01-01A

LbaCas12a Nuclease

500ug

4000

E381-01A

LwaCas13a Nuclease

200pmol

2600

E381-01B

LwaCas13a Nuclease

1000pmol

10400

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Cas13a核酸酶(又名C2c2)是VI型CRISPR-Cas系統(tǒng)效應(yīng)蛋白,具有RNA介導(dǎo)的RNA內(nèi)切酶活性。在靶標(biāo)單鏈RNA存在PFS序列的情況下,可特異性地切割靶標(biāo)RNA。此外,Cas13a還具有依賴(lài)于靶標(biāo)單鏈RNA的反式切割活性(即旁路切割活性),可用于開(kāi)發(fā)靶標(biāo)核酸的快速檢測(cè)試劑盒。

本公司開(kāi)發(fā)的Cas13a Nuclease源自L(fǎng)eptotrichia wadei(Lwa) 細(xì)菌,采用大腸桿菌重組表達(dá),純度超過(guò)95%,既可以用于體外RNA切割,體外RNA檢測(cè),也可用于活細(xì)胞RNA的調(diào)控、RNA基因編輯,同時(shí)也可以用于光學(xué)探針生物學(xué)標(biāo)記。Cas13a在體外與crRNA穩(wěn)定結(jié)合,將Cas13a/crRNA(或者crRNA質(zhì)粒)轉(zhuǎn)入細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)RNA的編輯,Cas13a/crRNA也可以被靶RNA激活,從而實(shí)現(xiàn)體外高靈敏度的RNA檢測(cè)。

使用建議:

1) 建議全程在冰上配制體系。

2) 為了保證反應(yīng)的正常進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的RNA模板。

3) 使用RNase Free的耗材(離心管、槍頭等)。

產(chǎn)品說(shuō)明:

1) 蛋白分子量為140kDa

140ng/μl = 1pmol/μl

2) crRNA設(shè)計(jì)

可以根據(jù)如下說(shuō)明設(shè)計(jì)LwaCas13a Nuclease 的crRNA。其序列為5’-GAUUUAGACUACCCCAAAAACGAAGGGGACUAAAACNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN-3’

其中,5’-Direct Repeat region (長(zhǎng)度36nt,直接重復(fù)區(qū),紅色字體) + Spacer region(長(zhǎng)度25-35nt,靶標(biāo)結(jié)合區(qū),灰色區(qū)域)-3’。

注:Cas13a切割靶標(biāo)ssRNA需要特定5’-A/U/C-3’的PFS(protospacer flanking sequence)。

保存溫度:

-70℃保存。

產(chǎn)品包裝

保存體系:

500mM NaCl,20mM sodium acetate,0.1mM EDTA,1mM TCEP,50% (v/v) Glycerol,pH6.0,at 25℃。

質(zhì)量保證:

經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測(cè)僅可見(jiàn)清晰單一的目的條帶,純度達(dá)95%;內(nèi)毒素含量< 100EU/mg;qPCR方法檢測(cè)無(wú)大腸桿菌基因組殘留;無(wú)RNase、核酸內(nèi)、外切酶污染。

切割體系(20μl):

在冰水浴上混合以下體系:

 

37 ℃每30-60s收集一次熒光,80-99cycles。

        For research use only.