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Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針
貨號 | T0402 | 售價(元) | 427.5 |
規(guī)格 | 50μg | CAS號 | 129787-64-0 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
價格 |
T0402 |
Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
T0403 |
Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
產(chǎn)品介紹
Rhod-2是一種可見光激發(fā)的高親和力Ca2+指示劑,與其他可見光激發(fā)熒光探針如Fluo-3/4相比,Rhod-2具有長波長,更適用于檢測具有較高自熒光現(xiàn)象的細胞和組織內(nèi)鈣離子水平以及檢測由光感受器和籠鎖鈣離子螯合劑光激活導(dǎo)致的鈣離子釋放。
與紫外光激發(fā)的熒光探針相比,如Fura-2和Indo-1,可見光激發(fā)Ca2+探針具有以下特點:1)可被大多數(shù)設(shè)備的激發(fā)器有效激發(fā),包括共聚焦激發(fā)掃描顯微鏡以及流式細胞儀等。2)具有更強的染料吸收性能,使得更低濃度的探針即可成功檢測Ca2+變化,從而降低了對活細胞的光毒性。3)Ca2+依賴性熒光強度增強,對Ca2+變化水平檢測敏感度更高。4)降低樣品自熒光以及光散射的干擾。5)兼容光激活探針以及UV-激發(fā)試劑,因此更方便于多參數(shù)檢測。5)無光譜偏移。
產(chǎn)品性質(zhì)
CAS號(CAS NO.):129787-64-0
分子式(Formula):C52H59N4O19Br
分子量(Molecular Weight):1123.9575
Ex/Em:549/ 578nm
溶解性(Solubility):溶于DMSO
存儲條件:-20 ℃避光保存。
使用說明:
1) (可選)配制Pluronic F-127母液:100mg Pluronic F-127粉末中加入0.5ml DMSO,配制成20%(w/v)的DMSO母液。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30min。溶液室溫保存,不要冷藏。如果有結(jié)晶析出,可以重新加熱后溶解,不影響使用。
2)Hanks?balanced salt solution(HBSS,不含Ca2+, Mg2+)。
使用方法(本實驗方案僅供參考,為得到最理想實驗結(jié)果,需根據(jù)具體的實驗情況優(yōu)化實驗條件。)
1)Rhod-2/AM儲存液的配制
利用高質(zhì)量無水DMSO溶解Rhod-2/AM配制成2-5mM的儲存液,該儲存液可分裝于-20℃避光干燥密封保存。每次使用前需回溫至室溫。
【注】:① 因為Rhod-2/AM在水中的溶解性和穩(wěn)定性較差,不可用水溶性緩沖液配制Rhod-2/AM儲存液。
② 溶解用的DMSO需要保證新鮮無水,否則將會導(dǎo)致AM 體水解,使熒光染料無法進入細胞,影響實驗效果。
2)Rhod-2/AM工作液的配制
利用合適緩沖液(如Hanks & Hepes )將Rhod-2/AM稀釋成1-10μM的工作液,具體稀釋方法如1 mM母液配制1 ml濃度為4 μM工作液,用1 ml 緩沖液稀釋4 μl 1mM母液即可,混勻。
【注】:① 典型工作液濃度為0.1-5μM,對于大多數(shù)細胞,我們推薦加載濃度4-5μM,具體的使用濃度需根據(jù)實驗要求進行優(yōu)化。為了避免過度加載造成細胞毒性,建議在取得有效結(jié)果的基礎(chǔ)上盡量使用最低探針濃度。
② Rhod-2/AM工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免反復(fù)凍存。
3)(可選)如果Rhod-2/AM進入細胞的效果不好,可向 Rhod-2/AM/DMSO 儲存液中加入適量20% Pluronic F127溶液,最終稀釋至其終濃度為0.02-0.05%,Pluronic F127 可以防止 Rhod-2/AM在緩沖液中聚合并能幫助其進入細胞。
【注】:Pluronic F127可降低Rhod-2/AM的穩(wěn)定性,因此只建議在配制工作液時加入,不建議將其加入儲存液長期保存。
4)取出預(yù)培養(yǎng)的細胞,除去培養(yǎng)基,使用緩沖液洗滌細胞3次。
【注】:如果使用含血清的培養(yǎng)基,血清中的酯酶會分解 AM 體,從而降低Rhod-2/AM進入細胞的效果。另外含有酚紅的培養(yǎng)基會使本底值略微偏高,所以加工作液之前需盡量去除培養(yǎng)基殘留。
5)將 Rhod-2/AM工作液加入細胞,加入量以覆蓋細胞為準(zhǔn)。在37℃培養(yǎng)15-60min,然后除去Rhod-2/AM工作液。
【注】:關(guān)于孵育的時間,如果首次做實驗不能確定,建議先孵育30min,看熒光效果:如果細胞死亡較多,適當(dāng)縮短時間;如果熒光強度太弱,適當(dāng)延長時間。
6)用不含探針緩沖液洗滌細胞 3 次,以充分去除殘留的Rhod-2/AM工作液。然后加入緩沖液覆蓋細胞。
7)37℃培養(yǎng)箱孵育約 20-30min,以確保 AM 體在細胞內(nèi)的完全去酯化作用。
8)流式細胞儀檢測細胞。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品相關(guān):
貨號 |
產(chǎn)品 |
規(guī)格 |
單價/元 |
T5022 |
Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
361 |
T5042 |
Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1368 |
T5062 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
T5082 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
T5040 |
Fluo-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
T5060 |
Fluo-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
T5080 |
Fluo-8 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
T5060 |
Fluo-8, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
TG201 |
Indo-1, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
399 |
TG221 |
Indo-1, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1591.25 |
T0404 |
Rhod-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
845.5 |
T0405 |
Rhod-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
2973.5 |
S8223 |
Acridine Orange 吖啶橙熒光素 |
1g |
154 |
S8224 |
Chromomycin A3 色霉素A3 |
1mg |
880 |
S8225 |
Chromomycin A3 色霉素A3 |
5mg |
3080 |
T601 |
BCECF, AM pH熒光探針 |
1mg |
1650 |
WU057 |
Monensin Solution (1,000×) 莫能霉素溶液(1,000×) |
1ml |
320 |
WU077 |
Monensin, Sodium Salt 莫能霉素(鈉鹽) |
100mg |
460 |
WU045 |
Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A(5mg/ml) |
200μl |
410 |
WU065 |
Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A(5mg/ml) |
1ml |
1500 |
WU085 |
Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A(粉末) |
5mg |
1200 |
WU050 |
Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A(粉末) |
25mg |
3500 |
WU060 |
Ionomycin, Free Base 離子霉素(游離酸) |
1mg |
535 |
WU070 |
Ionomycin, Free Base 離子霉素(游離酸) |
5mg |
1720 |
WU072 |
Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素(鈣鹽) |
1mg |
535 |
WU074 |
Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素(鈣鹽) |
5mg |
1720 |
WU055 |
Calcium Ionophore A23187鈣離子載體 |
1mg |
320 |
WU056 |
Calcium Ionophore A23187鈣離子載體 |
5mg |
1100 |
WU057 |
Calcium Ionophore 4-bromo-A23187 鈣離子載體 |
1mg |
1200 |