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超快轉膜緩沖液（20X）
| 貨號 | M4410 | 售價（元） | 300 |
| 規(guī)格 | 500ml | CAS號 |
- 產品簡介
- 相關產品
產品信息
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
價格/元 |
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M4410 |
超快轉膜緩沖液（20x） |
500ML |
300 |
產品簡介
超快轉膜液使用獨特配方，能高效超快地將蛋白轉移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。濕轉法（Tank blot）或半干轉法（Semi-dry blot）都可以使用。
產品特點：
快速高效：分子量100kD以下蛋白只需轉膜30-40分鐘。與傳統(tǒng)轉膜液相比，發(fā)熱量更低。
兼容性好：超快轉膜液能兼容LaemmLi膠，預制膠，Bis-Tris膠等多種凝膠。
轉移效率高：超快轉膜液對分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉移效率，有效的解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時轉移的問題。
使用說明
轉膜前準備：5-6張裁好的濾紙：裁好的轉印膜；足夠的1×超快轉移buffer。
一、濕轉法（Tank blot）
1、配制1×超快轉膜液
1升1×Western超快轉膜液：取50ml 20×超快轉膜液，加入750ml雙蒸水，混勻后加入200ml甲醇，混勻即可，現(xiàn)配現(xiàn)用，配好后置于冰上存放）。
2、將濾紙和海綿浸泡在1×超快轉膜液中，完全浸濕。
3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快轉膜液中（注意：在使用6%或8%分離膠轉移大分子蛋白時，應該降低甲醇含量至10%，以獲得更好轉移效果）。
4、按照以下順序做好轉印三明治結構。
注意：1、要徹底清除三明治結構中的氣泡，適當補加1×超快轉膜液保持三明治結構濕潤。
2、PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒。
3、三明治結構的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會影響轉印效果。如果太緊的話，可以去除陽極一側的海綿或濾紙。
5、將三明治結構放于轉移槽中。
一、半干轉（Semi-dry blot）1、按照下表配制1×超快轉膜液
2、將濾紙浸泡在1×超快轉膜液中，完全浸濕。
3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快
轉膜液中。
注意：水中漂洗時間一定不能超過2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉移。
4、按照以下順序做好轉印三明治結構。
半干轉時，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙≥膜≥膠≥上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會造成短路。
注意：PVDF膜使用前需用無水甲醇潤濕30秒。
三、轉移條件
1、濕轉
推薦使用恒流轉移，電流可設置350-400mA，轉膜液中離子成分較多，可以承受大電流，并且發(fā)熱量較低。
注：不推薦使用恒壓轉移，因轉膜液中離子成分較多，當電壓在100v左右時，電流會達到400mA，此時已達到普通電泳儀器zui大電流，隨著時間延長，可能無法達到穩(wěn)定的100v電壓。
2、半干轉
保存：常溫保存，有效期兩年。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。