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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡介

超快轉(zhuǎn)膜液使用獨特配方，能高效超快地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）或半干轉(zhuǎn)法（Semi-dry blot）都可以使用。

產(chǎn)品特點：

快速高效：分子量100kD以下蛋白只需轉(zhuǎn)膜30-40分鐘。與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液相比，發(fā)熱量更低。
兼容性好：超快轉(zhuǎn)膜液能兼容LaemmLi膠，預制膠，Bis-Tris膠等多種凝膠。
轉(zhuǎn)移效率高：超快轉(zhuǎn)膜液對分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉(zhuǎn)移效率，有效的解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時轉(zhuǎn)移的問題。

使用說明

轉(zhuǎn)膜前準備：5-6張裁好的濾紙：裁好的轉(zhuǎn)印膜；足夠的1×超快轉(zhuǎn)移buffer。

一、濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）

1、配制1×超快轉(zhuǎn)膜液

1升1×Western超快轉(zhuǎn)膜液：取50ml 20×超快轉(zhuǎn)膜液，加入750ml雙蒸水，混勻后加入200ml甲醇，混勻即可，現(xiàn)配現(xiàn)用，配好后置于冰上存放）。

2、將濾紙和海綿浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中（注意：在使用6%或8%分離膠轉(zhuǎn)移大分子蛋白時，應該降低甲醇含量至10%，以獲得更好轉(zhuǎn)移效果）。

注意：1、要徹底清除三明治結(jié)構(gòu)中的氣泡，適當補加1×超快轉(zhuǎn)膜液保持三明治結(jié)構(gòu)濕潤。

2、PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒。

3、三明治結(jié)構(gòu)的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會影響轉(zhuǎn)印效果。如果太緊的話，可以去除陽極一側(cè)的海綿或濾紙。

5、將三明治結(jié)構(gòu)放于轉(zhuǎn)移槽中。

  1、按照下表配制1×超快轉(zhuǎn)膜液

2、將濾紙浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快

轉(zhuǎn)膜液中。

注意：水中漂洗時間一定不能超過2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。

半干轉(zhuǎn)時，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙≥膜≥膠≥上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會造成短路。

注意：PVDF膜使用前需用無水甲醇潤濕30秒。

三、轉(zhuǎn)移條件

1、濕轉(zhuǎn)

 推薦使用恒流轉(zhuǎn)移，電流可設(shè)置350-400mA，轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，可以承受大電流，并且發(fā)熱量較低。

注：不推薦使用恒壓轉(zhuǎn)移，因轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，當電壓在100v左右時，電流會達到400mA，此時已達到普通電泳儀器zui大電流，隨著時間延長，可能無法達到穩(wěn)定的100v電壓。

2、半干轉(zhuǎn)

保存：常溫保存，有效期兩年。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。