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產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

酶聯(lián)免疫分析技術(shù)（ELISA）廣泛用于抗原、半抗原或抗體的定量或定性分析，辣根過(guò)氧化物酶（HRP）及其偶聯(lián)物是 ELISA 技術(shù)常用的一種酶，能催化底物如 3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）發(fā)生顯色反應(yīng)，從而進(jìn)行定量或定性分析。由于 TMB 比其他顯色底物具更高的靈敏度且無(wú)致癌性被廣泛使用，TMB 主要用于 ELISA，免疫斑點(diǎn)雜交或免疫組化等實(shí)驗(yàn)，也有報(bào)道將其用于氯的檢測(cè)分析。通常 TMB 顯色試劑由多個(gè)組分構(gòu)成，必須在使用前進(jìn)行配制，并且容易產(chǎn)生沉淀，使用相對(duì)不便且容易導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定。本品采用全新的 TMB 顯色技術(shù)，將所有相關(guān)試劑全部配在一個(gè)溶液，即僅由單一溶液組成，不僅簡(jiǎn)化了操作步驟，而且使檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。

本品專(zhuān)門(mén)為 ELISA 實(shí)驗(yàn)而設(shè)計(jì)。檢測(cè)原理在于 HRP 或其他適當(dāng)過(guò)氧化物酶能催化生成可溶的藍(lán)色產(chǎn)物，此時(shí)通?？稍?span> 370nm 測(cè)定吸光度。當(dāng)顯色反應(yīng)被酸性溶液（如 0.5-2M H2SO4，0.5M HCl，1M H3PO4）終止后，產(chǎn)物由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色，此時(shí)可在 450nm 測(cè)定吸光度。由于本品顯色敏感度高，線(xiàn)性濃度范圍較寬，極其適合用于定量 ELISA 分析。

本品用于 ELISA 檢測(cè)，每個(gè)樣品通常使用 0.1ml 顯色液，則 100ml 本品約檢測(cè) 1000 個(gè)樣品，500ml 本品約檢測(cè) 5000 個(gè)樣品。

保存與運(yùn)輸方法

保存：2-8℃避光保存，2 年有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1） 本品含TMB和H2O2，對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)注意防護(hù)。

2） 如發(fā)現(xiàn)本品出現(xiàn)渾濁或顏色變?yōu)樗{(lán)色，請(qǐng)停止使用。

3） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法（ELISA）

1） 使用之前，取出適量單組份 TMB 顯色液，使其回到室溫再開(kāi)始使用；

2） 參考 ELISA 檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟，當(dāng)與 HRP 標(biāo)記抗體孵育一段時(shí)間后，用適當(dāng)洗滌液洗滌 3-5 次，每次 3-5min。

3） 洗滌完畢后，去除洗滌液，加入 100μl 單組份 TMB 顯色液。

4） 室溫避光孵育 5-30min 或更長(zhǎng)時(shí)間（可長(zhǎng)達(dá) 24h），直至顯色到預(yù)期深淺?！咀⒁狻浚航ㄗh根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇最佳試劑用量、顯色時(shí)間和反應(yīng)溫度。

5） 直接在 370nm 測(cè)定吸光度?；蛘呒尤?span> 100μl 0.5-2M H2SO4 終止反應(yīng)，隨后在 450nm 測(cè)定吸光度。

常用問(wèn)題

1. 背景顯色太深

1）如果背景（沒(méi)有樣品的對(duì)照）顯色太深，一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進(jìn)行封閉，如商業(yè)化封閉液或者和一抗相同來(lái)源的血清（10%）進(jìn)行封閉。另一方面，使用經(jīng)過(guò)適當(dāng)吸附的二抗，以減小二抗的非特異性吸附。

2）可以考慮縮短顯色時(shí)間，或降低二抗?jié)舛?。另外，選擇適當(dāng)強(qiáng)度的洗滌液，或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間也會(huì)有所幫助。

2. 沒(méi)有顯色或顯色太弱

1）適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。檢測(cè)二抗效果，滴一滴稀釋二抗在離心管內(nèi)，檢測(cè)二抗是否被正常顯色。

2）可以考慮使用更加靈敏的放大檢測(cè)體系，例如生物素檢測(cè)體系。

3）可以適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間。

4）如果上述改進(jìn)不能獲得預(yù)期效果，可以考慮更換效果更好的一抗或 ELISA 試劑盒。