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TMB One Solution (HRP-based ELISA)單組分TMB顯色液

貨號 J4001 售價(元) 789
規(guī)格 500ml CAS號
  • 產品簡介
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產品信息:

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規(guī)格

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J2001

TMB One Solution (HRP-based ELISA)單組分 TMB 顯色液

100ml

2-8℃

J4001

TMB One Solution (HRP-based ELISA)單組分 TMB 顯色液

500ml

2-8℃






產品簡介

酶聯(lián)免疫分析技術(ELISA)廣泛用于抗原、半抗原或抗體的定量或定性分析,辣根過氧化物酶(HRP)及其偶聯(lián)物是 ELISA 技術常用的一種酶,能催化底物如 3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)發(fā)生顯色反應,從而進行定量或定性分析。由于 TMB 比其他顯色底物具更高的靈敏度且無致癌性被廣泛使用,TMB 主要用于 ELISA,免疫斑點雜交或免疫組化等實驗,也有報道將其用于氯的檢測分析。通常 TMB 顯色試劑由多個組分構成,必須在使用前進行配制,并且容易產生沉淀,使用相對不便且容易導致檢測結果不穩(wěn)定。本品采用全新的 TMB 顯色技術,將所有相關試劑全部配在一個溶液,即僅由單一溶液組成,不僅簡化了操作步驟,而且使檢測結果更加穩(wěn)定可靠。

本品專門為 ELISA 實驗而設計。檢測原理在于 HRP 或其他適當過氧化物酶能催化生成可溶的藍色產物,此時通??稍?span> 370nm 測定吸光度。當顯色反應被酸性溶液(如 0.5-2M H2SO4,0.5M HCl,1M H3PO4)終止后,產物由藍色轉為黃色,此時可在 450nm 測定吸光度。由于本品顯色敏感度高,線性濃度范圍較寬,極其適合用于定量 ELISA 分析。

本品用于 ELISA 檢測,每個樣品通常使用 0.1ml 顯色液,則 100ml 本品約檢測 1000 個樣品,500ml 本品約檢測 5000 個樣品。

保存與運輸方法

保存:2-8℃避光保存,2 年有效。

運輸:冰袋運輸。

注意事項

1) 本品含TMBH2O2,對人體有刺激性,請注意防護。

2) 如發(fā)現(xiàn)本品出現(xiàn)渾濁或顏色變?yōu)樗{色,請停止使用。

3) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法(ELISA

1) 使用之前,取出適量單組份 TMB 顯色液,使其回到室溫再開始使用;

2) 參考 ELISA 檢測試劑盒的實驗步驟,當與 HRP 標記抗體孵育一段時間后,用適當洗滌液洗滌 3-5 次,每次 3-5min。

3) 洗滌完畢后,去除洗滌液,加入 100μl 單組份 TMB 顯色液。

4) 室溫避光孵育 5-30min 或更長時間(可長達 24h),直至顯色到預期深淺?!咀⒁狻浚航ㄗh根據(jù)實驗需求選擇最佳試劑用量、顯色時間和反應溫度。

5) 直接在 370nm 測定吸光度。或者加入 100μl 0.5-2M H2SO4 終止反應,隨后在 450nm 測定吸光度。

常用問題

1. 背景顯色太深

1)如果背景(沒有樣品的對照)顯色太深,一方面需考慮使用適當?shù)姆忾]液進行封閉,如商業(yè)化封閉液或者和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉。另一方面,使用經(jīng)過適當吸附的二抗,以減小二抗的非特異性吸附。

2)可以考慮縮短顯色時間,或降低二抗?jié)舛取A硗猓x擇適當強度的洗滌液,或延長洗滌時間也會有所幫助。

2. 沒有顯色或顯色太弱

1)適當提高一抗或二抗的濃度。檢測二抗效果,滴一滴稀釋二抗在離心管內,檢測二抗是否被正常顯色。

2)可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系,例如生物素檢測體系。

3)可以適當延長顯色時間。

4)如果上述改進不能獲得預期效果,可以考慮更換效果更好的一抗或 ELISA 試劑盒。


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