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TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

貨號 wb30520-1KU 售價（元） 1000
規(guī)格 1KU CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品信息

貨號

名稱

規(guī)格

價格

wb30520-1KU

TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

1KU

1000

wb30520-5KU

TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

5KU

4599





產(chǎn)品描述

重組型TEV蛋白酶（rTEV）是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶，不僅保持天然TEV酶的功能活性，且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更好的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標簽的常用工具酶，具有很強的位點特異性，嚴格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30°C時可達到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和溫度4-30°C的廣泛范圍內(nèi)皆有活性，使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His標簽，通過Ni-NTA（P7151）樹脂去除，以達到純化目的蛋白的目的。

產(chǎn)品性質(zhì)

來源（Source）

大腸桿菌

外觀（Appearance）

無色透明液體

比活力（Specific Activity）

10 U/μl

活性定義（Unit Definition）

在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH8.0，0.5 mM EDTA，1mM DTT）中，30℃反應(yīng)1h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。

純化（Purification ）

Ni親和純化

純度（Purity）

≥95%（by SDS-PAGE）

產(chǎn)品組分

TEV Protease儲存液

10X Cleavage Buffer

25 mM Tris-HCl，pH 8.0

10 mM DTT

150 mM NaCl

500 mM Tris-HCl，pH 8.0

50 mM DTT

50 mM DTT

1Mm EDTA

50%（V / V）Glycerin

運輸與保存方法

冰袋（wet ice）運輸。

1. 在EP管中配制如下反應(yīng)體系，

融合蛋白

50 μg

rTEV Protease

2μl(10U/μl)

rTEV buffer （10×）

10μl

ddH2O（超純水）

up to 150 μl

2.反應(yīng)時間參考表

反應(yīng)體系

不同溫度下參考反應(yīng)時間

4°C

20°C

30°C

反應(yīng)時間

15-16h

6h

2h

待測融合蛋白100μg，加入TEV Protease 2μl，4℃反應(yīng)16小時，取酶切前后樣品SDS-PAGE檢測，如右圖所示 >90% 融合蛋白被切割。

TEV Protease活性測試


長期儲存于 -80℃，可保存2年；或小量分裝后保存于 -20℃，可保存6個月，避免反復凍融。10X rTEV buffer （10×）Buffer置于 -20℃保存。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。