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吖啶橙AO/EB雙熒光染色試劑盒

貨號 FBK006 售價(元) 1400
規(guī)格 500ml CAS號
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產品簡介:

貨號

產品名稱

規(guī)格

價格

FBK006

吖啶橙AO/EB雙熒光染色試劑盒

500ml

  1400

吖啶橙(Acridine Orange), 屬于三環(huán)雜芳香燃料,可以標記DNA、RNA,屬于異染性熒光染料,AO常用于細胞內DNA和RNA進行檢測。AO與核酸結合方式主要有:1、插入性結合,AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,這種結合方式主要為AO與DNA的結合,其熒光發(fā)射峰為530nm,激發(fā)后呈綠色熒光,其熒光發(fā)射峰為640nm,激發(fā)后呈紅色熒光,少量結合會呈桔黃色或桔紅色熒光。因此,AO嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色,與DNA單鏈或RNA結合時發(fā)橙紅色熒光。Ethidium Bromide嵌合到雙鏈DNA或RNA的堿基對中,無堿基特異性,發(fā)紅色熒光。

吖啶橙能透過胞膜完整的細胞,嵌入細胞核DNA,與雙鏈DNA結合后發(fā)出綠色熒光,溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞,嵌入核DNA,發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現為染色增強,熒光更為明亮,均勻的圓狀或固縮狀、團塊狀結構。非凋亡細胞核呈現熒光深淺不一的結構樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察,可見四種細胞形態(tài):活細胞(VN),核染色質著綠色并呈正常結構;早期凋亡細胞(VA),核染色質著綠色呈固縮狀或圓珠狀;晚期凋亡細胞(NVA),核染色質為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀;非凋亡的死亡細胞(NVN),核染色質著橘紅色并呈正常結構。本產品所含穩(wěn)定劑不影響實驗效果。有效期: 4度密封避光12個月有效
吖啶橙(AO)-EB雙染色試劑盒使用方法:(僅供參考)
   使用前先根據用量,將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液,先用現配。
a)對于貼壁細胞或爬片,去掉培養(yǎng)基,用PBS洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細胞,加入新的PBS;如果需要觀察全部細胞特性,保留未貼壁細胞,可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
b)對于懸浮細胞,可直接加入工作液或離心收集細胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。

染色結果:

活細胞

綠色熒光

死細胞

橙色熒光

 吖啶橙(AO)-EB雙染色試劑盒注意事項:

1. 用能通過活細胞膜與DNA結合后發(fā)藍色熒光的Hoechist 33342和只能通過死細胞與DNA結合后發(fā)紅色熒光的propidium iodide對細胞進行雙染的方法也比較常用。

2. 如有低溫離心機進行離心效果更佳。

3. 操作過程中應注意減少染色溶液暴露于強光下的時間。

4. 含酚紅培養(yǎng)基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。

5. 染色液工作濃度和染色時間可根據具體實驗情況適當調整,以期達到佳效果。

6. EB 和吖啶橙(Acridine Orange)有一定毒性,請小心操作。

特別提醒:

1) 本公司所有產品僅限于專業(yè)人員用于生命科學研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。

2) 本公司所有產品必須由合格專業(yè)技術人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程!

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