雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
| 貨號 | FBK001 | 售價（元） | 856 |
| 規(guī)格 | 100T | CAS號 |
- 產品簡介
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產品簡介：
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貨號 |
產品名稱 |
規(guī)格 |
價格 |
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FBK001 |
雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit |
100T |
856 |
螢火蟲螢光素酶催化luciferin發(fā)光的最強發(fā)光波長為560nm。海腎螢光素酶催化coelenterazine發(fā)光的最強發(fā)光波長為465nm。
本試劑盒的光信號可以通過化學發(fā)光儀、酶標儀或液閃測定儀進行測定。該試劑盒具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣，無細胞內源活性干擾等特點。
Figure 1. Bioluminescent reactions catalyzed by firefly luciferase??and Renilla luciferase.
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將報告基因細胞裂解液充分混勻后，按如下方式加入報告基因細胞裂解液，充分裂解細胞。
1.1)對于貼壁細胞：吸盡細胞培養(yǎng)液后，參考下表加入適量的報告基因細胞裂解液；對于懸浮細胞：離心去上清后，參考下表加入適量報告基因細胞裂解液。
注：裂解產物可室溫保存 6 h，-70℃可長期存放(裂解產物不能反復凍融);
2. Preparation of Firefly Working Solution
2.2)?配置10 mg/mL D-luciferin儲存液。2mg組份C溶解在200uL超純水中。儲存液-20℃可以儲存6個月反復凍融5次。
2.3）工作液配置 ：用組分?B?按照1:50稀釋以上D-luciferin儲存液，配制成?0.2 mg/mL?的螢火蟲螢光素酶工作液。
注：螢火蟲螢光素酶工作液不能反復凍融超過5次，若單次實驗用量較少，建議按單次使用量分裝成小規(guī)格。
3. Preparation of Renilla Working Solution
3.2)?配置2 mg/mL Coelenterazine儲存液。400ug組份C溶解在200uL超純水中。儲存液-20℃可以儲存3個月反復凍融5次。
3.3）工作液配置 ：用組分?D?按照1:50稀釋以上coelenterazine儲存液，配制成?0.04 mg/mL?的1x?coelenterazine工作液。
注：1×Coelenterazine工作液現(xiàn)配現(xiàn)用，配置后在3小時內使用。
4.1）按儀器操作說明書開啟具有檢測化學發(fā)光功能的儀器如酶標儀。
4.2）每個樣品測定時，取樣品?20-100uL(如果樣品量足夠，請加入?100 μL；如果樣品量不足可適當減少用量，但檢測孔用量需保持一致）。1× Lysis Buffer?為空白對照。
4.3）加入?100uL螢火蟲螢光素酶檢測液，用槍吹打均勻或用其它適當方式混勻后測定?RLU（relative light unit）值。
注：由于該發(fā)光為瞬時發(fā)光，建議加入螢火蟲螢光素酶工作液后，立即進行檢測。
4.4）加入?100uL 1× Coelenterazine?工作液，用槍吹打均勻或用其它適當方式混勻后測定?RLU（relative light unit）值。
2)?由于溫度對酶反應有影響，所以測定時，樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
3?本公司所有產品僅限于專業(yè)人員用于生命科學研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅。
4)?本公司所有產品必須由合格專業(yè)技術人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程！