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IP,coIP,CHIP細(xì)胞組織通用裂解液

貨號(hào) WB30326 售價(jià)(元) 350
規(guī)格 100ml CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

WB30326

IP,coIP,CHIP細(xì)胞組織通用裂解液

100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

? ? ??本產(chǎn)品包含20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,0.5% Sodium deoxycholate,以及AEBSF,sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等八種抑制劑及抑菌劑。其中AEBSF為PMSF的穩(wěn)定及安全替代品。您無需添加PMSF。其裂解產(chǎn)物適合coIP,IP,CHIP實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品本身可室溫保存,而裂解后的樣品建議低溫保存。

其裂解的樣品可不使用傳統(tǒng)BCA法,而通過文淵閣的抗干擾5分鐘蛋白定量試劑盒,一步操作,5分鐘獲得精準(zhǔn)定量。

產(chǎn)品組分及保存:

? ? ? 細(xì)胞組織通用裂解液:100ml

? ? ? 室溫或低溫保存皆可,一年有效。

使用說明

A,對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:

? ? ? 1. 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。冰浴15分鐘使細(xì)胞更充分裂解。

對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞。按照6孔板每孔細(xì)胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。冰浴15分鐘使細(xì)胞更充分裂解。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

? ? ? 2. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

B,對(duì)于組織樣品:

? ? ? 1. 把組織剪切成細(xì)小的碎片。

? ? ? 2. 按照每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)

? ? ? 3. 用玻璃勻漿器勻漿(或使用文淵閣開發(fā)的手持式電動(dòng)組織勻漿機(jī)勻漿),直至充分裂解。

? ? ? 4. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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