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IP,coIP,CHIP細胞組織通用裂解液
貨號 | WB30326 | 售價(元) | 350 |
規(guī)格 | 100ml | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
WB30326 |
IP,coIP,CHIP細胞組織通用裂解液 |
100ml |
本產(chǎn)品包含20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,0.5% Sodium deoxycholate,以及AEBSF,sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等八種抑制劑及抑菌劑。其中AEBSF為PMSF的穩(wěn)定及安全替代品。您無需添加PMSF。其裂解產(chǎn)物適合coIP,IP,CHIP實驗。產(chǎn)品本身可室溫保存,而裂解后的樣品建議低溫保存。
其裂解的樣品可不使用傳統(tǒng)BCA法,而通過文淵閣的抗干擾5分鐘蛋白定量試劑盒,一步操作,5分鐘獲得精準定量。
產(chǎn)品組分及保存:
細胞組織通用裂解液:100ml
室溫或低溫保存皆可,一年有效。
使用說明
A,對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用PBS洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,細胞就會被裂解。冰浴15分鐘使細胞更充分裂解。
對于懸浮細胞:離心收集細胞。按照6孔板每孔細胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。冰浴15分鐘使細胞更充分裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。
2. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
B,對于組織樣品:
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 按照每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)
3. 用玻璃勻漿器勻漿(或使用文淵閣開發(fā)的手持式電動組織勻漿機勻漿),直至充分裂解。
4. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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